Voorbereiding van 'n agarosegel vir elektroforese

Voorbereiding van Agarose Gel vir Elektroforese

Let wel: Dra altyd weggooibare handskoene!

Stap-vir-stap instruksies

Weeg agarose poeier:use weegpapier en 'n elektroniese balans om 0.3g agarosepoeier te meet (gebaseer op 'n 30ml-stelsel).

Berei TBST-buffer voor:pherstel 30ml van 1x TBST buffer in 'n 100ml Erlenmeyer fles.

Oplos van agarose poeier:pons die agarose poeier in die TBST buffer en skud goed.Plaas hulle inna 'n mikrogolfoond en verhit (gewoonlik vir 50 sekondes, bedek met aluminiumfoelie) tot heeltemal opgelos.

Verkoeling en byvoeging van nuklease:use handskoene om die mengsel uit die mikrogolf te haal en laat dit effens in koue water afkoel totdat dit warm is (ongeveer 60°C). Voeg 2µl nuklease (Eb plaasvervanger) by terwyl jy skud om deeglik te meng.

Voorbereiding van die gelvorm:

• Cleun en droog diegel skinkbord en gel giet toestelvan die elektroforese tenk.
•  Pryg die gelskinkbordin die binneste tenk en plaas die kam op 'n vaste posisie.
• Meng die agarosegel-oplossing, afgekoel tot ongeveer 65°C, en gooi dit versigtig op diegel skinkbordin diegel giet toestel, versprei dit stadig totdat dit 'n egalige jellaag op die glasplaat vorm.
• Laat dit by kamertemperatuur sit totdat die jel heeltemal stol.
• Verwyder die kam liggies vertikaal en verwyder die band.
• Plaas die gelskinkbordin die elektroforesetenk.

Belangrik: Maak seker dat daar geen lugborrels by die kamtande area is nie. Die oppervlak van die vloeistof moet glad wees sonder rimpelings.

Begin die gel

Laai die gel

Nadat die jel gestol het, plaas dit in die elektroforesetenk en gooi die elektroforesebuffer totdat die jel onder water is.

Voorbereiding van monsters

• Neem die merker en laaibuffer uit die yskas.
• Voeg 6µl laaibuffer by die monsters en meng goed.
• Gebruik 'n mikropipet en laai die monsters stadig in die groot putte van die jel (wees versigtig om nie die jel deur te steek nie en moenie die hele volume uitdeel om lugborrels te vermy nie).
• Laai die merker in enige van die klein putte (onthou sy posisie).

Begin elektroforese

• Bedek die elektroforesetenk en begin elektroforese onmiddellik nadat die gel gelaai is.
• Stel die spanning op 60-100V. Die monsters sal van die negatiewe elektrode (swart) na die positiewe elektrode (rooi) migreer.
• Hoër spanning verkort die effektiewe skeidingsreeks van die agarosegel.
• Stop elektroforese wanneer die broomfenolblou kleurstof ongeveer 1 cm vanaf die onderrand van die jelplaat bereik.

Waarneming van resultate

Nadat u die bande geskei het, stop elektroforese, haal die gel uit en bespeur en fotografeer dit direk.

Gebruik 'n gel-beeldstelsel om die bande te fotografeer en waar te neem (kyk of daar enige bande vir die merker of monsters is).

Soek die merker nadat jy jou gelbandkaart gekry het. Op grond van die merker kan jy die teikenbande bepaal!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) word al meer as 50 jaar lank elektroforeseprodukte vervaardig. Ons bied ons horisontale elektroforese stelsels hier viragarose gelelektroforese.Kieshorisontale elektroforese stelselsvan Beijing liuyi vir jou jelelektroforese-eksperiment om jou navorsing in die biotegnologie-industrie te help.

Ons bied verskillende modelle van horisontale elektroforese tenks vir giet en klein hardloopagarosegels te grootagarosegels

Keurgids vir horisontale ondergedompelde gel-elektroforese-eenheid

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) spesialiseer al meer as 50 jaar in die vervaardiging van elektroforese-instrumente met ons eie professionele tegniese span en R&D-sentrum. Ons het betroubare en volledige produksielyn van ontwerp tot inspeksie, en pakhuis, sowel as bemarkingsondersteuning. Ons vernaamste produkte is Elektroforese Sel (tenk/kamer), Elektroforese Kragtoevoer, Blou LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ens. Ons verskaf ook die laboratorium instrumente soos PCR instrument, vortex menger en sentrifuge vir laboratorium.

As jy enige aankoopplan vir ons produkte het, moet asseblief nie huiwer om ons te kontak nie. Jy kan vir ons boodskap stuur by e-pos[e-pos beskerm]of[e-pos beskerm], of skakel ons asseblief by +86 15810650221 of voeg Whatsapp +86 15810650221 by, of Wechat: 15810650221.

Skandeer asseblief die QR-kode om op Whatsapp of WeChat by te voeg.