Inleiding
Gelelektroforese is 'n fundamentele tegniek in molekulêre biologie, wat wyd gebruik word vir die skeiding van proteïene, nukleïensure en ander makromolekules. Behoorlike beheer van monstervolume, spanning en elektroforesetyd is van kardinale belang vir die bereiking van akkurate en reproduceerbare resultate.Ons laboratoriumkollega bied aanbeste praktyke vir die bestuur van hierdie parameters tydens SDS-PAGE gelelektroforese.
Beijing Liuyi Biotegnologie gel elektroforese produkte
Monstervolume: Verseker konsekwentheid
Wanneer SDS-PAGE elektroforese uitgevoer word, is die monstervolume 'n sleutelfaktor wat die resolusie van jou resultate aansienlik kan beïnvloed. Dit word gewoonlik aanbeveel om 10 µL totale proteïen per put te laai. Om konsekwentheid te verseker en monsterdiffusie tussen aangrensende putte te voorkom, is dit belangrik om 'n gelyke volume van 1x laaibuffer in enige leë putte te laai. Hierdie voorsorgmaatreël help om die verspreiding van monsters na naburige bane te voorkom, wat kan voorkom as die put leeg gelaat word.
Voordat u u monsters laai, begin altyd deur 'n molekulêre gewigmerker by een put te voeg. Dit maak voorsiening vir maklike identifikasie van proteïengroottes na elektroforese.
Spanningsbeheer: balanseer spoed en resolusie
Die spanning wat tydens elektroforese toegepas word, beïnvloed direk beide die spoed waarteen monsters deur die jel migreer en die resolusie van die skeiding. Vir SDS-PAGE is dit raadsaam om met 'n lae spanning van ongeveer 80V te begin. Hierdie aanvanklike lae spanning laat die monsters stadig en eweredig migreer, en konsentreer hulle in 'n skerp band soos hulle die skeidingsgel binnegaan.
Sodra die monsters ten volle in die skeidingsgel ingegaan het, kan die spanning tot 120V verhoog word. Hierdie hoër spanning versnel die migrasie, wat verseker dat die proteïene doeltreffend geskei word volgens hul molekulêre gewig. Dit is noodsaaklik om die vordering van die broomfenolblou kleurstoffront te monitor, wat die voltooiing van die elektroforese aandui. Vir gels met 'n konsentrasie van 10-12% is 80-90 minute tipies voldoende; vir 15% gels moet jy egter die looptyd effens verleng.
Tydsbestuur: Weet wanneer om te stop
Tydsberekening is nog 'n kritieke faktor in gelelektroforese. Om die gel vir 'n te lank of te kort tydperk te laat loop, kan lei tot suboptimale skeiding. Die migrasie van die broomfenolblou kleurstof is 'n nuttige aanwyser: wanneer dit die onderkant van die jel bereik, is dit gewoonlik tyd om die lopie te stop. Vir standaard gels, soos 10-12%, is 'n elektroforese duur van ongeveer 80-90 minute tipies voldoende. Vir hoër persentasie gels, soos 15%, moet die looptyd verleng word om volledige skeiding van proteïene te verseker.
Bufferbestuur: Hergebruik en voorbereiding van buffers
Elektroforesebuffer kan 1-2 keer hergebruik word, afhangende van jou laboratorium se spesifieke toestande. Vir optimale resultate word dit egter aanbeveel om vars 10x buffer voor te berei en dit net voor gebruik te verdun. Dit verseker dat die buffer sy doeltreffendheid behou, wat lei tot meer betroubare elektroforese resultate.
Beijing Liuyi Biotegnologie gel elektroforese produkte
Deur die monstervolume, spanning en elektroforesetyd noukeurig te beheer, kan u die akkuraatheid en reproduceerbaarheid van u gelelektroforeseresultate aansienlik verbeter. Die implementering van hierdie beste praktyke in jou laboratoriumwerk sal jou help om duideliker en meer duidelike bande te bereik, wat lei tot beter data vir stroomaf-analise.
As jy meer goeie metodes het om gelelektroforese-eksperiment te optimaliseer, welkom om met ons te bespreek!
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) spesialiseer al meer as 50 jaar in die vervaardiging van elektroforese-instrumente met ons eie professionele tegniese span en R&D-sentrum. Ons het betroubare en volledige produksielyn van ontwerp tot inspeksie, en pakhuis, sowel as bemarkingsondersteuning. Ons vernaamste produkte is Elektroforese Sel (tenk/kamer), Elektroforese Kragtoevoer, Blou LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ens. Ons verskaf ook die laboratorium instrumente soos PCR instrument, vortex menger en sentrifuge vir laboratorium.
As jy enige aankoopplan vir ons produkte het, moet asseblief nie huiwer om ons te kontak nie. Jy kan vir ons boodskap stuur by e-pos[e-pos beskerm]of[e-pos beskerm], of skakel ons asseblief by +86 15810650221 of voeg Whatsapp +86 15810650221 by, of Wechat: 15810650221.
Skandeer asseblief die QR-kode om op Whatsapp of WeChat by te voeg.
Postyd: 20 Aug. 2024