Monster Voorbereiding enLaai tans
As gevolg van die gebruik van 'n deurlopende bufferstelsel sonder stapelgel in die meeste gevalle, behoort die monsters 'n gepaste konsentrasie en 'n klein volume te hê. Gebruik apipetom die monster stadig by te voeg, met 5-10 μg per put, om 'n beduidende afname in resolusie te vermy. Wanneerlaai monster, moet die kragtoevoer afgeskakel word. Die monster moet 'n indikatorkleurstof (0,025% broomfenolblou of oranje) en sukrose (10-15%) of gliserol (5-10%) bevat om die digtheid daarvan te verhoog, die monster te konsentreer en diffusie te voorkom. Soms kan sukrose of gliserol egter U-vormige bande in elektroforese-resultate veroorsaak, wat vermy kan word deur 2,5% Ficoll (polivinielpirrolidon) te gebruik.
Elektroforese
Die spanning vir elektroforese is 5-15 V/cm, gewoonlik ongeveer 10 V/cm. Vir die skeiding van groot molekules moet die spanning laer wees, gewoonlik nie meer as 5 V/cm nie.
Kleuring
Fluorescerende kleurstof etidiumbromied (EB) word algemeen gebruik vir kleuring om DNA-bande in agarosegel waar te neem. EB kan tussen basispare DNA-molekules invoeg, wat veroorsaak dat EB met DNA bind. Die absorpsie van 260 nm ultraviolet lig deur DNA word na EB oorgedra, en die gebonde EB straal fluoressensie uit by 590 nm in die rooi-oranje gebied van die sigbare ligspektrum. Deur die jel vir 1 uur in 'n 1 mmol/L MgSO4-oplossing te kleur, kan agtergrondfluoressensie wat deur ongebonde EB veroorsaak word, verminder, wat die opsporing van klein hoeveelhede DNA vergemaklik.
EB-kleurstof het verskeie voordele: dit is maklik om te gebruik, breek nie nukleïensure nie, het hoë sensitiwiteit en kan beide DNA en RNA vlek. EB kan enige tyd by die monster gevoeg word en met behulp van UV-absorpsie opgespoor word. Na kleuring kan EB verwyder word deur ekstraksie met n-butanol.
EB-kleurstof is egter 'n kragtige mutageen, en voorsorgmaatreëls, soos die dra van poliëtileenhandskoene, moet tydens hantering getref word. Akridienoranje is ook 'n algemeen gebruikte kleurstof omdat dit kan onderskei tussen enkel- en dubbelstrengs nukleïensure (DNA, RNA). Dit vertoon groen fluoressensie (530 nm) vir dubbelstring nukleïensure en rooi fluoressensie (640 nm) vir enkelstrengs nukleïensure. Daarbenewens kan ander kleurstowwe soos metileenblou, metileengroen en kinolien B vir kleuring gebruik word.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) spesialiseer al meer as 50 jaar in die vervaardiging van elektroforese-instrumente met ons eie professionele tegniese span en R&D-sentrum. Ons het betroubare en volledige produksielyn van ontwerp tot inspeksie, en pakhuis, sowel as bemarkingsondersteuning. Ons hoofprodukte is Elektroforese-sel (tenk/kamer), Elektroforese-kragtoevoer, Blou LED-verligter, UV-verligter, gelbeeld- en analisestelsel, ens.
Ons is nou op soek na vennote, beide OEM elektroforese tenk en verspreiders word verwelkom.
As jy enige aankoopplan vir ons produkte het, moet asseblief nie huiwer om ons te kontak nie. Jy kan vir ons boodskap stuur by e-pos[e-pos beskerm]of[e-pos beskerm], of skakel ons asseblief by +86 15810650221 of voeg Whatsapp +86 15810650221 by, of Wechat: 15810650221.
Skandeer asseblief die QR-kode om op Whatsapp of WeChat by te voeg.
Postyd: 20 Desember 2023